ความหลากหลายของยีนและชนิดอัลลิลของยีนที่เป็นรหัสในการสร้างโปรตีน บนพื้นผิวของเชื้อไธเลเรียในโคไทย

Kasetsart University, Bangkok (Thailand)
Ministry of Agriculture and Cooperatives, Bangkok (Thailand)
Ministry of Science, Technology and Environment, Bangkok (Thailand)
Ministry of University Affairs, Bangkok (Thailand)

37. Kasetsart University Annual Conference

Bangkok (Thailand)

3-5 Feb 1999

Bangkok (Thailand)

p. 299-305

511 p.

อังกฤษ

Thai National AGRIS Centre, Office of The University Library Kasetsart University, P.O. BOX 1084 Kasetsart Chatuchak, Bangkok 10903, Thailand

L73-โรคสัตว์

CATTLE;THEILERIA;MICROBIOLOGICAL ANALYSIS;GENES;PCR

โคนม;โคเนื้อ;ไธเลเรีย;การจำแนกเชื้อ;การแยกเชื้อ;ดีเอ็นเอ;ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอเรส

ตัวอย่างดีเอ็นเอของเชื้อไธเลเรียที่แยกได้จากโคนมและโคเนื้อในบางพื้นที่ของประเทศไทยจำนวน 28 ตัวอย่าง ถูกนำมาทำการวิเคราะห์จำแนกชนิดโดยเทคนิคปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส ซึ่งใช้ไพรเมอร์จำนวน 5 คู่ โดยไพรเมอร์ 2 คู่แรกนั้นจำเพาะต่อยีนที่เป็นรหัสในการสร้างโปรตีนบนพื้นผิวเชื้อขนาด 32 กิโลดาลตัน (p32) และขนาดโปรตีน 33/34 กิโลดาลตัน (p33/34) ของเชื้อ Theileria sergenti และ T. buffeli ตามลำดับ ไพรเมอร์อีก 3 คู่ จำเพาะต่ออัลลิลของยีน p32 ของ Japanese T. sergenti-Ikeda stock ชนิด I-type, Japanese T. sergenti-Chitose stock ชนิด C-type และต่ออัลลิลของยีน p33/34 ของ Australian T. buffeli-Warwick stock ชนิด B1-type ผลจากการทำปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส พบว่ามีเชื้อไธเลเรียที่ได้จากโคเนื้อและโคนมจำนวน 14 ตัวอย่างได้ชิ้นส่วนของยีน p32 อย่างเดียว อีก 7 ตัวอย่าง ได้ชิ้นส่วนของยีน p32 และ p33/34 ส่วนอีก 7 ตัวอย่าง ไม่ได้ชิ้นส่วนของทั้งสองยีน เมื่อจำแนกตามชนิดอัลลิลของยีนพบว่า เชื้อไธเลเรียที่ได้จากโคเนื้อและโคนมจำนวน 14 ตัวอย่างเป็นชนิด C-type และ 8 ตัวอย่าง เป็นชนิดผสมกันระหว่าง I-type, C-type หรือ B1-type ส่วนที่เหลืออีก 5 ตัวอย่าง ยังไม่สามารถจำแนกชนิดได้ ผลจากการศึกษาในครั้งนี้สรุปได้ว่า มีเชื้อไธเลเรียคล้ายชนิด T. sergenti/T. buffeli แพร่กระจายอยู่ในประเทศไทย เชื้อส่วนใหญ่เป็นอัลลิลชนิด C-type ส่วนเชื้อที่เป็น B1-type มักผสมกับเชื้อที่เป็น C-type และ I-type

Twenty-eight field isolated Theileria parasite DNAs obtained from dairy and beef cattle in distinct geographical areas of Thailand were characterized by using PCR amplification with five sets of oligonucleotide primers. Two sets of them were modified from two genes of immuno dominant major piroplasm surface protein (MPSP) coding for 32 kDa (p32) of T. sergenti and 33/34 kDa (p33/34) of T. buffeli. The other three sets of primers were basically generated from three alleles of MPSP which were specific for Japanese T. sergenti-Ikeda stock (I-type), Japanese T. sergenti-Chitose stock (C-type) and Australian T. buffeli-Warwick stock (B1-type), respectively. The results indicated that 14 out of 28 isolates were amplified by the p32-specific primer whereas 7 isolates were amplified by the p32 and p33/34 specific primers and the other 7 isolates were not amplified by both of the primers. In addition, by using the allele-specific PCR, 14 out of 28 isolates contained C-type MPSP whereas 8 isolates were mixtures of C, I and B1 type parasites. Interestingly, 5 out of 28 isolated could not be amplified by these 3 specific primers. These results suggested that field isolates of Theileria parasires which closely related to T. sergenti/T. buffeli distributed in Thailand. The majority of Theileria parasites contained only C-type parasites, whereas B1-type parasites which showed the mixed population with C-and I-type parasites.

[1] นพพร ศราธพันธุ์ (กรมปศุสัตว์ สถาบันสุขภาพสัตว์แห่งชาติ กลุ่มปาราสิตวิทยา)
[2] สิรินันท์ นิลวรางกูร (มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ คณะแพทยศาสตร์ ภาควิชาชีวเคมี)
[3] จันทรา ตนันท์ยุทธวงศ์ (มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ คณะแพทยศาสตร์ ภาควิชาชีวเคมี)
[4] โอนูมะ, มิซาโอะ (มหาวิทยาลัยฮอกไกโด บัณฑิตวิทยาลัยสัตวแพทย์ ภาควิชาการควบคุมโรค)
[5] โกสุม จันทร์ศิริ (มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ คณะแพทยศาสตร์ ภาควิชาชีวเคมี)

[1] Nopporn Sarataphan (Department of Livestock Development, Bangkok (Thailand). National Institute of Animal Health. Parasitology Section)
[2] Sirinun Nilwarangkoon (Srinakharinwirot University, Bangkok (Thailand). Faculty of Medicine. Department of Biochemistry)
[3] Chantra Tananyutthawongese (Srinakharinwirot University, Bangkok (Thailand). Faculty of Medicine. Department of Biochemistry)
[4] Onuma, Misao (Hokkaido University, Hokkaido (Japan). Graduate School of Veterinary Medicine. Department of Disease Control)
[5] Kosum Chansiri (Srinakharinwirot University, Bangkok (Thailand). Faculty of Medicine. Department of Biochemistry)